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            ELISA檢測陰性對照(品)的概念與要求

            日期:2024-06-13 00:31
            瀏覽次數:121
            摘要: ELISA檢測,按照試劑說明書要求,每次試驗、每塊扳上都要設置陰性對照(品)對照。 1、陰性對照(品)的概念與要求: 所謂陰性對照(品),應當是本項檢測試驗中采用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質性,又不含有待檢物質,并能客觀比較和鑒別處理因素(血清免 疫學試驗中有特異性抗原與抗體反應)之間的差異。因此,用動物血清或其制品(如牛血清白蛋白等)代替陰性人血清作為對照品,從理論和實踐上都是不可取的,弊端甚多,無須細述。注意:據我所知,國產ELISA試劑中,有的廠牌是用動物血清制品稀...

            ELISA檢測,按照試劑說明書要求,每次試驗、每塊扳上都要設置陰性對照(品)對照。

            1、陰性對照(品)的概念與要求:
            所謂陰性對照(品),應當是本項檢測試驗中采用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質性,又不含有待檢物質,并能客觀比較和鑒別處理因素(血清免 疫學試驗中有特異性抗原與抗體反應)之間的差異。因此,用動物血清或其制品(如牛血清白蛋白等)代替陰性人血清作為對照品,從理論和實踐上都是不可取的,弊端甚多,無須細述。注意:據我所知,國產ELISA試劑中,有的廠牌是用動物血清制品稀釋配置、或與部分人血清混合配置的;其二,陰性對照讀數,并非是“越低越好"。NCx值接近0.00X水平,這是假象!試想一下,真正采用“陰性人血清"的陰性對照品,NCx值會如此之低嗎?舉個例子,雅培乙肝六項EIA試劑的NCx值,分別為:0.010(HBsAg)、0.027(抗—HBs)、0.035(HBeAg)、1.083(抗—HBe)、1.065(抗—HBc)、0.045(抗HBc-IgM)。生物梅里埃的HIV試劑NCx是0.091。辨別試劑NCx值是否合理的一個很簡單的方法,只要對比大量陰性樣本的實際讀數就“一目了然"啦!
            一個題外插曲:表明ELISA試劑內在質量的一個重要統計標志,就是要看:陰性樣本的的上限不應當大于、必須小于C.O.I.=1.00;反之,陽性樣本的的下限不可小于、應當大于C.O.I.=1.00!早年我用SPSS軟件輸出阿克蘇HIV和國產甲、乙試劑檢測600例左右的健康人體檢血清的三幅直方圖,可以表明陰性樣本的不同分布特征,頗有意思。  
            我為什么要如此細說NCx呢?因為NCx值在Cut off值計算中是相當舉足輕重的(詳后)。

            2、陰性對照(品)分為兩類
            一是代表受檢人血清中并不含有、或方法學靈敏度未能檢出的待檢物的基準水平,并且是結果判斷值(Cut off)計算式中決定“是"(陽性)、或“否"(陰性)的唯 1可變值。陰性對照值高,導致假陰性;反之,導致假陽性。如:HBsAg、HBeAg、抗—HBc等。二是陰性對照設置,在方法學上要求加入指示性定量標準品,如中和劑HBeAg,定量HBcAg等,用以檢測抗—HBe、抗—HBc?;蛘?,選取代表平均水平的正常人血清用作陰性對照,如檢測抗—HBc IgM。此類Cut off 值計算時,多數均包括陰性和陽性對照值2個可變值。
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